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人肺炎支原体(MP) ELISA检测试剂盒
起订量(盒)价格
1-51280 /盒
≥51080 /盒
  • 品牌:广州奥瑞达生物
  • 产地:广州
  • 型号:48T/96T
  • 货号:ARD91967
  • 发布日期: 2024-01-04
  • 更新日期: 2024-03-01
产品详请
产地 广州
保存条件 2-8℃防潮避光
品牌 广州奥瑞达生物
货号 ARD91967
检测方法 酶联免疫
保质期 6个月
规格 48T/96T
适应物种 人,小鼠,大鼠,猪牛羊,鸡鸭鹅,鱼等
检测限 参考说明书
数量 150
用途范围 仅用于科研实验,不得用于临床诊断
英文名称 MP
标记物 详见说明书
样本 血清,血浆,组织匀浆液,细胞培养上清液
应用 科研实验,环保,生物产业,农业
是否进口

人肺炎支原体(MP) ELISA检测试剂盒检测原理

试剂盒采用双抗原一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被肺炎支原体抗体包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗原,经过温育并C底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中人肺炎支原体(MP)的存在与否。

人肺炎支原体(MP) ELISA检测试剂盒样品收集、处理及保存方法

1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

人肺炎支原体(MP) ELISA检测试剂盒自备物品

1. 酶标仪(450nm)

2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

人肺炎支原体(MP) ELISA检测试剂盒操作注意事项

1.  试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3.  预处理后的样本无需稀释,直接取50μL加样即可。

4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.  所有液体组分使用前充分摇匀。

人肺炎支原体(MP) ELISA检测试剂盒试剂盒组成

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

12孔×8条

12孔×4条

阴性对照

0.5mL

0.5mL

阳性对照

0.5mL

0.5mL

检测抗-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

样本稀释液

6mL

3mL

封板膜

2张

2张

说明书

1份

1份

自封袋

1个

1个

 

人肺炎支原体(MP) ELISA检测试剂盒试剂的准备

 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

人肺炎支原体(MP) ELISA检测试剂盒洗板方法

1.  手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。

2.  自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

人肺炎支原体(MP) ELISA检测试剂盒操作步骤

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置阴、阳性对照孔和样本孔,阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL;

3.   待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;

4.  随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗原100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

人肺炎支原体(MP) ELISA检测试剂盒结果判断

 1.  试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;

                阴性对照孔OD值平均值≤0.15。

2.  临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15

3.  阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性

4.  阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性

人肺炎支原体(MP) ELISA检测试剂盒试剂盒性能

1.  准确性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;阴性对照孔OD值平均值≤0.15,说明试验结果有效。

2.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

3.  重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

4.  贮藏:2-8℃,避光防潮保存。

5.  有效期:6个月

人肺炎支原体(MP) ELISA检测试剂盒免责声明

1.   试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。

2.   严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。