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布鲁氏菌荧光PCR核酸检测试剂盒
  • 品牌:广州奥瑞达生物
  • 产地:广州
  • 型号:50T
  • 货号:08ARD-68
  • 发布日期: 2026-01-26
  • 更新日期: 2026-02-03
产品详请
产地 广州
品牌 广州奥瑞达生物
货号 08ARD-68
用途 反刍动物病诊断
包装规格 50T
是否进口

反刍动物病检测,检测样本:血样和原乳

布鲁氏菌荧光PCR核酸检测试剂盒

使用PCR鉴定试剂盒的标准操作步骤及关键注意事项

PCR鉴定试剂盒是一种用于通过聚合酶链反应(PCR)技术进行特定DNA或RNA序列检测的工具包。它们通过特异性引物和探针识别目标序列,结合荧光定量PCR技术,能够快速、准确地鉴定和定量目标核酸。使用PCR鉴定试剂盒时,操作步骤主要包括以下几个方面:

布鲁氏菌荧光PCR核酸检测试剂盒

一、实验前准备
1、 试剂与设备检查
确认试剂盒完整性(含Buffer、dNTPs、引物、酶等),热启动酶需检查激活条件。
校准移液枪,准备冰盒(非热启动酶需全程低温操作)。
检查PCR仪、离心机等设备状态,超净台紫外消毒15分钟。
2、 样本处理
样本类型(血液/组织/细胞)需按规范裂解(如Trizol法提取DNA/RNA)。

模板DNA用量控制在1-100ng,避免降解或污染。

布鲁氏菌荧光PCR核酸检测试剂盒

二、反应体系配制
1、根据试剂盒说明书的要求,配制PCR反应体系,包括引物、荧光探针、dNTPs、DNA聚合酶等成分。这些成分需要按照特定的比例和顺序加入到反应管中。

2、将提取的DNA加入到PCR反应体系中,进行PCR反应。反应条件包括变性、退火、延伸三个步骤,每个步骤需要特定的温度和时间。反应次数通常为25-35个循环。

布鲁氏菌荧光PCR核酸检测试剂盒

三、PCR程序设置
PCR程序设置对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。通常的PCR程序包括初始变性、循环放大以及终止扩增三个阶段。例如,在93℃预变性3-5分钟,进入循环扩增阶段:93℃40秒→58℃30秒→72℃60秒,循环30-35次,Z后在72℃保温7分钟。
四、 结果判别

将PCR反应后的产物进行荧光信号检测,根据荧光信号的出现情况判断是否存在目标DNA的存在。这一步骤可能通过荧光定量PCR仪进行,仪器会记录每个循环的荧光信号强度,形成扩增曲线。

布鲁氏菌荧光PCR核酸检测试剂盒

五、注意事项
1、全程避免RNase/DNase污染(耗材需DEPC处理)。
2、不同批次试剂需预实验验证。
3、实验记录需包含加样顺序、仪器参数等关键信息。
布鲁氏菌荧光PCR核酸检测试剂盒