动物疫病ELISA 实验台速查SOP

广州奥瑞达直接给你一份猪场最常用、通用型 ELISA 极简SOP，您打印出来贴实验台就能用，专门适配猪瘟、蓝耳、伪狂、圆环、腹泻这类兽医试剂盒。

                                                                       (动 物 疫 病 ELISA 实 验 台 速 查 SOP)

 一、实验前准备——广州奥瑞达生物
（1）试剂盒取出，室温平衡20～30分钟
（2）浓缩洗涤液提前稀释，有结晶先温水浴溶解
（3） 样本离心取清亮血清，避免溶血、浑浊
（4）准备枪头、吸水纸、封板膜、计时器
 
二、加样——广州奥瑞达生物
（1） 按顺序加：空白孔 → 阴性对照 → 阳性对照 → 样本
（2）加样精准，无气泡、不挂壁
（3）加完立即贴封板膜，防止蒸发
 
三、温育——广州奥瑞达生物
（1）统一 37℃恒温孵育，时间严格按说明书
（2） 不许随意缩短/延长
（3）封板膜贴紧，避免边缘效应
 
四、洗涤（最关键）——广州奥瑞达生物
（1） 甩干孔内液体，每孔加满洗涤液
（2） 浸泡30～60秒，弃液
（3）重复洗涤3～5次（按说明书）
（4）最后在吸水纸上用力拍干，无残留水珠
 
五、加酶结合物 → 温育 → 再洗涤——广州奥瑞达生物
步骤同上，操作一致，时间卡准。
 
六、显色 ——广州奥瑞达生物
（1） 每孔加底物液，避光37℃显色
（2） 观察颜色：阳性孔明显变蓝/黄，即可终止
（3） 不许显色过度
 
七、终止与读数——广州奥瑞达生物
（1）加终止液，轻轻震荡混匀
（2）15分钟内上机读数
（3） 波长常用：450nm（部分用630nm校正）
 
八、结果有效标准——广州奥瑞达生物
- 空白孔OD值极低
- 阴性对照正常
- 阳性对照明显阳性
- 标准曲线/判定值符合说明书要求
满足以上才算有效，否则重做。
 
九、常见问题一句话解决——广州奥瑞达生物
- 颜色都很深、背景高 → 洗涤不彻底
- 颜色都很浅、不出值 → 试剂没回温/温育不足/洗太过
- 复孔差很大 → 加样不准、洗涤不均、有气泡
- 完全无色 → 漏加酶结合物或底物